Coloration (microscopie)

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La coloration de tissu biologique est souvent nécessaire pour l'identification. Certaines colorations sont compatibles avec la vie cellulaire, d'autres nécessitent la fixation des tissus, et parfois la création de coupes histologiques.

Colorations au microscope photonique[modifier | modifier le code]

Pour permettre l'observation des organites en microscopie photonique, des substances colorantes sont utilisées.

Colorations topographiques[modifier | modifier le code]

Un colorant est une solution aqueuse qui peut se charger électriquement et qui peut colorer une substance ou un ensemble de substances de manière stable.

Constitué d'un groupement chromophore (couleur) et d'un groupement auxochrome (groupement ionisé): fixation permanente sur des groupements acides ou basiques des constituants cellulaires (à un pH donné)

Caractéristiques :

  • non spécifique d'un type de molécule ;
  • donne une vue d'ensemble du tissu : renseigne sur la répartition, l'architecture et la structure des cellules ;
  • résulte de l'action conjuguée d'un colorant acide (éosine) et d'un colorant basique (hémalun, bleu de méthylène).

Les substances acides de la cellule sont colorées par un colorant basique, les substances basiques de la cellule par un colorant acide.

Cette coloration colore un type de charge. On peut voir la morphologie de la cellule (forme), la position du noyau et sa forme. Ainsi, on peut déterminer le nombre de types cellulaires dans le tissu et la structure de ce tissu (cellules collées ou non).

Colorations histochimiques[modifier | modifier le code]

Réactions rédox agissant sur des macromolécules, renseignent sur la constitution chimique de la cellule. Exemples :

  • PAS (acide périodique-Schiff)
  • Feulgen-Rosenbeck (ADN - Quantitatif)
  • Brachet (ADN et/ou ARN)
  • Perl's (met en évidence le fer)
  • Par précipitation de sel d'argent ( visualisation de la mélanine, amines biogènes, neurofibrilles, etc.).

Types de tissu révélés par coloration[modifier | modifier le code]

Colorants acides[modifier | modifier le code]

Les colorants acides ont une bonne affinité avec les substances alcalines, ils mettent en évidence des tissus basiques donc acidophiles.

Colorants basiques[modifier | modifier le code]

Coloration au Carmin d'un Monogène (ver parasite)

Ils mettent en évidence des tissus acides, dits basophiles.

Colorations argentiques[modifier | modifier le code]

Certains tissus fixent l'argent. On parle de structures argentaffines ou de structures argyrophiles.

Coloration aux sels de Chrome[modifier | modifier le code]

On met ainsi en évidence les tissus chromaffines, comme la médullo-surrénale.

Différentes méthodes de coloration[modifier | modifier le code]

Plusieurs méthodes de coloration ont été mises au point pour révéler certaines structures. En voici quelques-unes répertoriées dans un tableau :

Coloration Composants Cytoplasme Collagène Élastine ADN Autres pH
Hématoxyline et éosine Hématoxyline et éosine rouge/rose rouge/rose rouge bleu/noir  ?
van Gieson Hématoxyline, fuchsine et acide picrique jaune rouge - (parfois rose) noir  ?
Goldner Hématoxyline, acide de fuchsine, vert lumière (Lichtgrün) rouge vert - noir  ?
Elastica Résorcine, fuchsine brun-violet
Azan Azocarmine, bleu aniline rouge bleu - (parfois rose) rouge
Ladewig Orange G, bleu de méthylène, fuchsine acide, hématoxyline rouge (érythrocyte orange) bleu noir
Sudan III Colorant soluble dans les lipides Lipides en orange
PAS Hématoxyline, acide periodique, réactif de Schiff bleu Polysaccharides : violet-rouge
Nissl Thionine (ou toluidine ou violet de crésyle) bleu (avec le RE) bleu

Colorations utilisées en microbiologie[modifier | modifier le code]

Même s'il ne s'agit pas directement de colorations histologiques, ces méthodes visent à distinguer entre plusieurs types cellulaires. Elles utilisent aussi les mêmes types de colorants :

Colorations au microscope électronique[modifier | modifier le code]

Pour permettre l'observation des organites en microscopie électronique, des métaux lourds comme le plomb, l'uranium ou le tungstène sont utilisés. Les régions à colorer deviennent sombres car que peu d'électrons travers ce type de métaux.